基于 Miniscope 微型荧光显微镜的自由活动小鼠钙成像、认知测试及定制化操作性条件反射装置构建 发消息、输入 @ 选择技能或 / 选择文件

操作性条件反射箱在动物研究中广泛用于研究认知、动机和学习过程。当与快速发展的脑成像技术和脑活动操控技术相结合时,操作性条件反射箱成为神经科学研究的强大工具。市售的行为测试和成像装置通常成本高昂。在此,我们介绍一种定制化操作性条件反射箱,无经验的使用者可在几天内用相对廉价且易于获取的材料构建完成。与其他开源和闭源解决方案相比,我们的操作性装置具有以下优势:成本相对较低,支持复杂的行为任务,设置用户友好,并且通过 UCLA Miniscope 的行为视频成像和钙成像验证了其功能。使用该装置,我们重现了先前发表的研究结果:青春期暴露于社会挫败压力的小鼠在成年后执行 Go/No-Go 任务时表现出抑制控制障碍。我们还展示了自由活动小鼠在 Go/No-Go 测试期间获取的内侧前额叶皮层(mPFC)神经元活动的钙成像数据,并表明神经元群体活动在任务的第 1 天到第 14 天期间增加。我们认为,我们的操作性条件反射箱是市售同类产品的更经济替代方案,并且与其他开源替代品相比,在多功能性和用户友好设置之间实现了更好的平衡。

一、引言

操作性条件反射箱(“斯金纳箱”)广泛用于动物研究,以研究啮齿类动物、某些鸟类和非人类灵长类动物的学习和其他认知过程。操作性条件反射箱允许精确控制刺激(听觉、视觉等)的呈现,并测量对这些刺激的反应(如压杆或鼻触)。通过控制刺激的呈现及其与测试对象反应的关系,研究人员可以设计行为任务来评估动机、学习(操作性和经典条件反射)或其他认知过程(如注意力、抑制控制等)。光遗传学工具和用于钙成像的荧光生物传感器使在这些行为任务期间记录和控制大脑活动成为可能,以识别参与明显行为的神经回路。这种组合方法是许多临床前研究的基础,这些研究调查模型生物的行为特征,这些特征类似于人类精神疾病中观察到的症状,并为精神疾病的神经生物学基础、潜在治疗和预防策略提供了重要见解。

随着行为和脑成像研究中使用的技术不断进步,其相关成本显著增加,市售的条件反射和成像装置变得更加复杂,但也更加昂贵。研究人员通常需要在设备上投入大量资金,这些设备还伴随着额外费用、专有软件、高昂的维护成本、昂贵的更新和附加功能。因此,对开源平台和工具的兴趣日益增加。许多科学实验室现在生产自己的行为平台、脑成像系统和数据分析工具,以解决特定的研究问题。

在这里,我们介绍构建基于开源 Arduino 的操作性条件反射箱的程序,该装置与体内钙成像平台 UCLA Miniscope 配对,用于评估自由活动小鼠执行 Go/No-Go 任务时内侧前额叶皮层(mPFC)的神经元活动。我们的操作性装置成本相对较低,这使其优于市售替代品。与开源替代品相比,它具有更广泛的可编程刺激(两种听觉和两种视觉),提供了具有两种冲动性测量以及注意力的复杂行为任务的代码和设置,并且具有相对用户友好的设置,电子元件更少,编程量更少。最后,它通过行为视频成像和钙成像验证了功能。我们通过重现先前的研究结果来证明我们装置的有效性:青春期暴露于加速社会挫败压力(AcSD)会导致成年后 Go/No-Go 任务表现受损。Go/No-Go 任务测量抑制先前习得的不再适当反应的能力(即抑制控制或运动冲动性),并且已表明 mPFC 的神经元在该任务中编码信息。使用我们的装置,我们提供了钙成像数据,显示雄性小鼠在执行任务的早期阶段与后期阶段时 mPFC 神经元群体活动的变化。Go/No-Go 任务在啮齿类动物和人类中都有对应任务,该任务中的障碍以及 mPFC 活动异常是几种青春期发病的精神疾病的特征性表现。我们认为,我们的装置是临床前和转化研究中研究适应性和病理性行为神经基础的经济实惠且多功能的工具。

二、材料与方法

01. 实验动物

实验程序按照加拿大动物护理委员会的指导方针进行,并经麦吉尔大学和道格拉斯医院动物护理委员会批准。所有小鼠饲养于道格拉斯心理健康大学研究所神经表型分析中心的温度(21–22°C)和湿度(60%)控制的饲养室中,处于 12/12 小时光 / 暗周期(光照于上午 8 点开启)。实验期间小鼠可自由获取食物和水(Go/No-Go 实验的食物限制阶段除外)。小鼠被随机分配至各实验条件。

由杰克逊实验室提供的雄性 C57BL/6J 野生型小鼠(n=27)于出生后第 24 天(PND24)到达饲养设施。这些小鼠在暴露于加速社会挫败压力(AcSD)前以每笼 3–4 只群居,暴露后单笼饲养。获得的雄性 CD-1 退休繁殖小鼠(年龄超过三个月)在 AcSD 范式中用作攻击鼠。

本研究主要旨在验证定制化行为和成像装置,因此仅使用雄性小鼠作为实验对象。尽管青春期社会压力效应的性别差异很可能存在且颇具研究价值,但超出了本文范围。

02. 加速社会挫败压力(AcSD)范式

AcSD 程序如先前所述执行。AcSD 装置由一个透明大鼠笼组成,笼内有两个小鼠饲养隔间,由透明带孔的中央隔板分隔,允许小鼠之间进行感觉接触但无法身体接触。在 AcSD 阶段前,对攻击鼠 CD-1 小鼠针对青春期 C57BL/6J 小鼠的攻击性进行筛选。随后,它们被饲养在隔板的一侧,即挫败阶段发生的位置。

青春期 C57BL/6J 小鼠每天暴露于攻击性 CD-1 小鼠两次,共持续 4 天(在 PND25 至 PND28 之间;“挫败” 组)。挫败阶段结束后,实验小鼠被饲养在笼隔板的空侧直至下一阶段。为确保对青春期小鼠的攻击行为,每次 AcSD 阶段前,通过让 CD-1 攻击鼠短暂(30 秒)接触一只成年(PND65)C57BL/6 小鼠来激发其攻击性。AcSD 最后一阶段后 24 小时,在社会互动测试(SIT)中评估 C57BL/6J 青春期小鼠对陌生 CD-1 小鼠的接近和 / 或回避行为。我们根据存在和不存在陌生 CD-1 小鼠时在互动区(IZ)停留时间的比率计算互动比率(IR)。比率≥1 的小鼠被归类为 “ resilient( resilient 需根据上下文确定专业术语,此处暂保留英文)”,比率 < 1 的为 “易感”。

03. 钙成像

0301. GRIN 透镜植入和病毒注射手术

GRIN 透镜植入和病毒注射在同一手术阶段完成。小鼠用异氟烷麻醉(诱导浓度 5%,维持浓度 1–2%),并置于立体定位框架上。涂抹眼用软膏防止眼睛干燥。腹腔注射生理盐水和卡洛芬以维持水分和减轻炎症。通过从两眼之间至两耳之间对皮肤和结缔组织进行环形切除,暴露颅骨。借助微型钻和螺丝刀,将两颗螺丝固定在颅骨后部的每块顶骨中。在颅骨上刚好位于内侧前额叶皮层(mPFC)上方钻第三个孔(直径 1.1 mm)[以前囟为中心,前后(AP)+1.7 mm,内外侧(ML)±0.5 mm]。使用 5 µl 微注射器在 6 分钟内将 0.3 µl 的 AAV9-Syn-GCaMP6f-WPRE 病毒(AddGene)注射到 mPFC 中 [AP +1.7 mm,ML ±0.5 mm,背腹侧(DV)–1.8 mm]。10 分钟后,将针头从脑中拔出,并通过病毒注射时使用的同一颅骨孔插入由真空固定器固定的 1×4 mm GRIN 透镜。GRIN 透镜底部定位在与病毒注射相同的坐标处。我们未抽吸脑组织,因为根据我们的经验,病毒注射在脑中形成的孔足以容纳 GRIN 透镜植入。GRIN 透镜通过胶水和牙科水泥固定在颅骨上。透镜顶部通过放置一个由 PCR 管底部制成的小保护帽进行保护,并用硅胶固定。

三周后,再次对小鼠进行麻醉,并使用牙科水泥将铝制基板固定在头部,以便连接微型落射荧光内窥镜(UCLA Miniscope v3)。

0302. 钙瞬变的记录与分析

为确保各阶段之间的一致性,小鼠从训练第 1 天到测试最后一天的每个 Go/No-Go 任务阶段均佩戴 Miniscope。然而,仅在测试阶段(最后 14 天)进行记录。使用 UCLA Miniscope 的开源软件(Miniscope DAQ 软件 1.0,GitHub 版本 2020 年 8 月 30 日)以每秒 20 帧的速度记录钙瞬变。我们对整个 30 分钟的 Go/No-Go 阶段进行记录。细胞检测和钙轨迹提取使用 Suite2p 软件包完成。通过滑动窗口法校正因光漂白导致的阶段内信号漂移。为可视化神经元活动对 “Go” 和 “No-Go” 提示呈现的响应,我们计算所有检测到的神经元(无论活动变化是否显著)以及仅提示调制神经元的荧光 z 评分变化,并绘制各试验的中位荧光值。定制的 MATLAB 脚本可根据合理请求提供。

04. Go/No-Go 任务

为测试认知功能,我们使用了如先前所述的 Go/No-Go 任务。与先前描述的程序唯一不同之处在于增加了初始训练阶段(持续 3 天),其中主动鼻触孔持续照明直至小鼠鼻触。在此阶段,每次反应均导致奖励发放和 10 秒超时,此时鼻触孔灯光熄灭且反应无奖励。此阶段用于微调 Miniscope 记录参数。首先,小鼠在青春期经历 AcSD 和 SIT;约 30 天后,在成年期,对小鼠进行食物限制至自由摄食体重的 85%,并开始行为任务训练。使用巧克力味无尘精密颗粒饲料(BioServ)作为强化物。该任务要求小鼠在有限时间内对照亮的 Go 提示做出鼻触反应,或在 Go 提示与听觉 No-Go 提示同时呈现时抑制对该提示的反应。对 Go 提示的鼻触反应(“命中”)导致食物颗粒发放,而对 No-Go 提示的相同反应被视为 “commission error(需根据上下文确定专业术语,此处暂保留英文)” 并导致奖励 omission。提示呈现前 3–9 秒窗口内的反应被视为过早反应,导致奖励 omission 和阶段重启。我们还计算了正确反应率,代表小鼠在 Go 和 No-Go 阶段中获得的所有可用奖励的比例。

05. 定制化操作性条件反射箱与钙成像装置

所有小鼠在现场构建的定制化操作性条件反射箱中进行 Go/No-Go 任务的训练和测试。装置的总体布局如图 1 所示。台式电脑连接至 Arduino UNO 微控制器,微控制器进而控制操作性条件反射箱的输入和输出。台式电脑还连接至 UCLA Miniscope 的数据采集盒(DAQ)和用于观察小鼠运动的 USB 摄像头。最后,Arduino 连接至 DAQ,以在每个行为阶段开始时启动钙活动记录。

图1. 装置概览。台式电脑为 Arduino UNO 微控制器供电并进行控制,微控制器进而控制操作性条件反射箱的鼻触传感器、食物分配器和视听刺激。Arduino 和电脑还连接至 Miniscope 数据采集盒(DAQ)。DAQ 依次控制用于观察动物的 USB 摄像头和用于记录钙活动的 Miniscope 摄像头。USB 摄像头通过 USB 线由电脑供电,记录参数可通过 Miniscope 软件及为此安装的其他软件进行调整。

0501. 操作性条件反射箱的聚碳酸酯部件

操作性条件反射箱的底座和壁使用聚碳酸酯板构建(图 2)。我们使用塑料胶将各个聚碳酸酯部件粘合在一起,形成箱体的壁。为便于拆卸和维护,我们使用白色胶泥(UHU)或防水胶带(如 Gorilla)固定电子元件。箱体底座由底板和前壁组成,前壁有三个相同的开口,一个用于食物颗粒接收器,两个用于鼻触孔(图 2A–C)。重要的是,我们设计的鼻触孔尺寸可容纳佩戴 Miniscope 的小鼠头部。壁的背面装有食物分配器、Arduino 和所有电子元件(图 2B,M;详细描述如下)。我们使用当地塑料商店的服务切割构成操作性条件反射箱主体的聚碳酸酯板(图 2L)。各个聚碳酸酯部件的尺寸见表 1。带有悬垂部分的 V 形聚碳酸酯屏障形成测试箱的后壁,防止小鼠在行为测试期间跳出(图 2D–F)。最后,外壁作为箱体的独立部分构建,可拆除以便清洁(图 2G–I)。这些外壁顶部有两块薄聚碳酸酯片,其上装有换向器,连接至移液管盒,允许佩戴 Miniscope 的小鼠自由移动(图 2J)。

东莞富临医疗科技有限公司为中国客户提供:Miniscope 微型荧光显微镜(单色/双色)

图2. 操作性条件反射箱组件。A–C. 操作性条件反射箱底座由底板和前壁组成,前壁有两个鼻触孔和一个食物接收器开口(A)。该壁背面装有电子元件(B)和颗粒分配器(C)。构成箱体底座的各个聚碳酸酯部件如图(L)所示,其尺寸见表 1;M 为控制传感器和箱体刺激的电子电路示意图。D–F. 一组额外的可拆卸壁限制小鼠的活动范围,使其行为集中于鼻触孔和颗粒分配器(可选)。G–I. 可拆卸外壳通过外壁和箱体上方的两条板条完善箱体结构,板条用于连接带换向器的移液管吸头盒和 USB 摄像头(数据未显示;J)。带换向器的移液管盒通过美纹胶带铰接。K. 完整的操作性条件反射箱。扩展数据图 2-1 显示用于连接 Arduino 电路的 DAQ 改造,扩展数据图 2-2 至 2-11 包含 Go/No-Go 任务的 Arduino 代码。

表1:构建一个操作性条件反射箱所需的聚碳酸酯部件及其尺寸(如图 2L 编号所示)。

0502. 电子元件、Arduino 电路与编程

电子电路的连接如图 2M 所示。红外 LED 和传感器检测鼻触孔的进入。每个鼻触孔上方有一个绿色 LED,还有一个用于呈现视觉刺激的室内灯。我们安装了两个扬声器用于呈现听觉刺激。我们通过 3D 打印内部部件修改了 Med Associates 大鼠食物颗粒分配器,以容纳小鼠尺寸的食物颗粒(无尘巧克力味颗粒)。选择该颗粒分配器基于我们可用的材料。也可直接使用小鼠颗粒分配器而无需修改,且开源替代品也可用(见讨论)。颗粒分配器通过螺丝固定在箱体前壁上。Arduino 微控制器集成并控制电路的所有输入和输出,包括每个行为阶段开始时钙成像记录的启动。我们使用 DAQ 的内置端口在行为测试阶段开始时从 Arduino 发送触发信号。这需要对 DAQ 电路板进行修改,以包括与 Arduino 的 SMA 电缆连接(Digikey,ID:WM9477-ND;见表 2)(扩展数据图 2-1)。

表2:构建一个操作性条件反射箱所需的组件列表。

各阶段任务的 Arduino 脚本作为扩展数据提供(扩展数据图 2-2、2-3、2-4、2-5、2-6、2-7、2-8、2-9、2-10、2-11)。脚本命名为 stage0 至 stage4,后者为实际的 Go/No-Go 任务,所有先前阶段为训练阶段。构建一个操作性条件反射箱所需的所有组件列于表 2。

三、结果

01. 青春期 AcSD 在社会互动测试(SIT)中导致韧性和易感表型

青春期暴露于 AcSD 后,易感小鼠的互动比率(IR)较低(图 3A),且在 SIT 的互动区(IZ)停留时间少于对照组(图 3B)。单因素方差分析显示,韧性小鼠对社交目标的接近程度与对照组相似(n=23;IR:F (2,20)=6.88,p=0.0053,Holm–Sidak 事后检验:对照组与易感组比较,t (20)=3.04,p=0.0128;对照组与韧性组比较,t (20)=1.21,p=0.2389;互动区停留时间:F (2,20)=7.68,p=0.0034,Holm–Sidak 事后检验:对照组与易感组比较,t (20)=2.85,p=0.0197;对照组与韧性组比较,t (20)=1.81,p=0.0852)。相应地,韧性组、易感组和对照组小鼠在 SIT 场地角落区域的停留时间存在显著差异(H (2)=6.51,p=0.0386;图 3C)。如我们先前报道,青春期 AcSD 后韧性小鼠数量多于易感小鼠,分别为 60% 和 40%(图 3D)。这是青春期 AcSD 范式与成年期 10 天慢性社会挫败压力(CSDS)范式的特征性差异,后者导致大多数小鼠表现出易感表型。

图3. 操作性装置验证 —— 评估青春期社会压力对成年期认知的影响。青春期小鼠暴露于 4 天加速社会挫败压力(AcSD),并根据社会互动测试(SIT)分为韧性组和易感组。A. 易感小鼠互动比率(IR)<1,而韧性小鼠 IR≥1。* 与对照组差异显著,p=0.01。B. 易感小鼠在 SIT 场地互动区(IZ)停留时间更短 —— 回避陌生 CD-1 小鼠 —— 且在 SIT 场地角落区域停留时间更长(C)。* 与对照组差异显著,p=0.02。C. 青春期暴露于 AcSD 的小鼠中,多数(60%)表现为韧性。D. AcSD 和 SIT 一个月后,成年期小鼠先接受训练,再进行 Go/No-Go 任务测试。E. Go/No-Go 任务示意图。小鼠在 “Go” 阶段通过鼻触获得奖励(“命中”),在 “No-Go” 阶段需抑制鼻触。Commission error 表示 No-Go 阶段的错误反应。任何阶段中 Go(灯光)或 No-Go(灯光 + 声音)提示前的反应均视为 “过早” 反应,无奖励。F. 正确反应率代表对照组和挫败小鼠在 Go 和 No-Go 阶段中获得的可用奖励比例。G. 挫败小鼠在 No-Go 阶段出现更多 commission error。H. Go 阶段中对照组和挫败小鼠的正确反应次数无差异。

02. 青春期暴露于 AcSD 导致成年期 Go/No-Go 任务测量的抑制控制受损

成年期,即在 SIT 约一个月后(图 3E),对照组和社会挫败小鼠接受 Go/No-Go 任务训练和测试(图 3F)。为增强统计分析效力,且因我们先前已表明两组在任务中表现相似,Go/No-Go 数据未按青春期观察到的韧性和易感表型进行分组。2×2 方差分析显示,正确反应率存在显著的时间主效应(图 3G),表明总体而言,小鼠随时间推移表现改善(n=17,F (13,195)=14.87,p<0.0001)。commission error 比例也存在显著的时间主效应(F (13,195)=13.85,p<0.0001;图 3H),表明总体而言,小鼠在 No-Go 阶段更善于正确抑制反应。最后,commission error 比例存在显著的 TIME×STRESS 组交互效应(F (13,195)=1.92,p=0.0303),提示挫败小鼠相对于对照组表现出抑制控制障碍,因其在 No-Go 阶段更难以抑制反应。命中比例的时间主效应和 TIME×STRESS 组交互效应均不显著(图 3I),表明挫败小鼠与对照组在任务参与度上随时间变化相似(时间效应,F (4.40,66.00)=1.18,p=0.3269;交互效应,F (13,195)=1.67,p=0.0689)。这些发现与我们先前关于雄性小鼠青春期暴露于社会挫败压力后成年期认知障碍的研究结果一致。

03. Miniscope 钙成像显示 mPFC 神经元对 Go 和 No-Go 提示的反应活动增加

为测试我们的装置是否可用于自由活动小鼠的钙成像,我们使用 UCLA Miniscope v3 记录表达 GCaMP6f 的 mPFC 神经元的钙活动,同时小鼠(n=4)执行 Go/No-Go 任务。小鼠在任务中的行为表现见扩展数据图 4-1。组织学数据显示,病毒注射和 GRIN 透镜放置靶向 mPFC 的前扣带回(Cg1)和边缘前区(PrL)(图 4A)。我们计算了 Go/No-Go 任务第 1 天和第 14 天各试验中,提示呈现前 3 秒和后 10 秒内神经元细胞的群体活动中位数(图 4C–H)。选择此时窗以包括最小 pretrial 期和提示呈现后至下一阶段开始的最短时间(图 4B)。数据以荧光信号的中位 z 评分变化(ΔF/F)表示。我们发现提示呈现后第 1 天至第 14 天总体活动增加(图 4C)。当分别计算 Go 和 No-Go 提示的群体活动时,观察到第 1 天至第 14 天活动同样增加(图 4D),表明总体活动增加适用于 Go 和 No-Go 阶段。最后,当根据各试验的正确和错误反应(Go 和 No-Go 阶段合并)分别计算时,我们观察到群体活动同样增加(图 4E),表明总体活动增加与任务表现无关。如果仅选择通过提示呈现显著调节的神经元(基于 Wilcoxon 秩和检验,临界显著性值 p<0.0001;图 4F),总体活动增加仍然存在。个体提示调节神经元的热图显示,在第 1 天(图 4G),提示呈现后神经元反应多样,神经元间强度和时间各异,而在第 14 天(图 4H),提示呈现后神经元活动更显著且同步。

图4. 钙成像。A. UCLA Miniscope v3、表达 GCaMP6f 的 mPFC 神经元代表性图像(箭头所示)及 GRIN 透镜的代表性放置位置。绿色免疫荧光为 GCaMP6f;青色复染为 DAPI。Cg1:扣带回皮层;PrL:边缘前区皮层。B. 基于反应类型的 Go 和 No-Go 阶段示意图。C. 任务第 1 天和第 14 天,Go 和 No-Go 提示呈现前后各试验的平均神经元活动。数据以中位(±MAD)荧光 z 评分变化(ΔF/F)表示,n=4。D. 与 C 相同的数据,分别显示 Go 和 No-Go 阶段。E. 相同数据显示阶段中正确或错误反应的神经元反应(Go 和 No-Go 阶段合并显示)。F. 仅考虑显著调制神经元(Wilcoxon 检验,p<0.0001)时,对 Go 和 No-Go 提示的荧光中位 z 评分变化。G–H. 与 F 相同的数据,表示为 - 1 至 + 1 的荧光变化,每行代表单个神经元随时间的荧光变化。扩展数据图 4-1 显示 Miniscope 记录期间小鼠的 Go/No-Go 任务表现。

四、讨论

本文介绍了一种低成本定制化操作性条件反射装置,用于评估小鼠认知行为并结合钙成像技术。通过该装置,我们发现小鼠可轻松学习 Go/No-Go 任务,而青春期暴露于社会挫败压力的小鼠在此任务中表现受损,这与我们先前的研究结果一致。我们证明,该装置可与头戴式 Miniscope 配对,记录自由活动小鼠的钙活动,并发现内侧前额叶皮层(mPFC)神经元活动在任务第 1 天至第 14 天期间呈增加趋势。我们认为,该装置是研究适应性和病理性行为相关神经元活动的有用工具。

与其他市售和开源同类装置相比,我们的装置具有多个优势。它可在 2-3 天内用基本工具和材料构建完成,且我们提供了 Go/No-Go 任务训练和测试阶段的 Arduino 代码。尽管我们的操作性条件反射箱仅使用 Arduino,使其易于设置,但也能执行如 Go/No-Go 等复杂任务。这使用户能够快速轻松地重现行为测试装置,同时提供高度的灵活性和多功能性。箱体采用易于拆卸的外壁设计以便清洁,我们发现聚碳酸酯板耐频繁用酒精和其他清洁剂清洗。目前我们使用两个操作性条件反射箱并行进行实验,因为每个 Miniscope 需要独立的台式电脑以实现最佳功能。然而,若有足够空间或其他记录工具,我们的装置易于扩展,甚至无需直接连接电脑即可运行。Arduino 可通过自身电源运行,实验阶段可使用重置按钮重启。最后,我们的操作性装置允许在小鼠佩戴头戴式 Miniscope 时对鼻触行为进行强化 —— 这是操作性研究中广泛使用的反应方式。使用我们的装置可与其他采用此类小鼠强化反应的研究进行充分比较,同时增加了自由活动动物钙成像的优势。考虑到已证实的小鼠和大鼠鼻触与压杆行为之间的差异,这一点很重要。我们复现了实验室先前关于青春期社会挫败压力导致成年期 Go/No-Go 任务表现受损的研究结果,这证明了我们研究结果的可靠性和操作性条件反射装置的有效性。

用户可能会发现我们的操作性条件反射箱中一个难以复制的方面是对 Med Associates 颗粒分配器进行改造以递送食物颗粒。作为我们方法的替代方案,我们建议读者考虑其他定制化颗粒分配器替代方案。除了我们使用 Suite2p 软件包分析钙成像数据外,还有多种替代方案,换向器也有开源替代品。我们装置的一个可能改进是制造定制的 Arduino 扩展板以提高电子电路的布线稳定性。我们当前设计未包含扩展板,以减少定制制造的需求。此外,由于可用性原因,我们使用半透明聚碳酸酯板构建装置,且我们将箱体置于隔音隔间中,但使用不透明板构建可能减少测试期间小鼠的干扰。最后,我们想指出,我们的装置设计使其能够与其他脑活动成像和操控技术(如光遗传学和光纤光度法)结合使用。

创建评估行为神经基础的新工具是神经科学研究不可或缺的一部分。随着易于获取的开源工具变得越来越多样化,解决特定理论驱动问题的可能性也在增加。我们的定制化操作性条件反射装置是对不断发展的开源科学领域的有益补充。

东莞富临医疗科技有限公司是 Miniscope 在亚洲的代理商, 为亚洲客户提供“微型荧光显微镜”和“钙成像”

公司地址:广东省东莞市樟木头镇塑金国际1号楼810

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